Matière
Base de la culture cellulaire : principe et applications en pratique
Description
- La cellule
- Méthodes de culture :
> Explants primaires (cultures histiotypiques), culture en monocouche, en suspension
> Dissociations mécanique et chimique
> Culture en continu : lignées cellulaires finies et continues (comparaison des propriétés, origine,
méthodes d’établissement) - Composition d’un milieu de culture type
- Étude théorique des facteurs physico-chimiques et métaboliques
concourant au succès de la culture de cellules (température, pH, pression osmotique, oxygène, gaz carbonique, sucres, acides aminés, vitamines, facteurs sériques) et détermination pratique de la valeur de ces différents facteurs en fonction de la nature de la culture (choix de l’incubateur, d’un tampon, d’une solution saline, d’un milieu nutritif, d’un type de sérum) - Travail stérile et contaminations (mycoplasmes)
- Appareillages et problèmes divers
Compétences requises
La participation à cette formation ne nécessite pas de pré-requis spécifiques au regard du public auquel elle s’adresse.
Compétences visées
- Maîtriser les bases de la culture cellulaire
- Développer des cultures cellulaires
- Gérer ces cultures dans son laboratoire
Modalités d'organisation et de suivi
Cette formation comprend des cours théoriques et des travaux pratiques.
Les TP s’attacheront à montrer les bonnes pratiques en culture cellulaire (travail sous PSM de type II), à étudier les propriétés de croissance et les fonctions d’une culture déterminée (repiquage de cellules adhérentes, dénombrement cellulaire, tests de cytotoxicité, techniques d’immunocytochimie, cytométrie en flux). Ils découvriront également les modalités de cryopréservation et de décongélation de cellules.
Un support de formation sera remis aux participants sous format papier et/ou numérique au début de la formation.